人Bcl2關(guān)聯(lián)死亡啟動(dòng)子elisa試劑盒是用于定量檢測(cè)人體內(nèi)BAD蛋白水平的實(shí)驗(yàn)室診斷工具。BAD是一種重要的細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白，與Bcl-2家族的其他成員相互作用，參與調(diào)控細(xì)胞生存和死亡的信號(hào)通路。在多種疾病狀態(tài)下，包括癌癥、神經(jīng)退行性疾病等，BAD蛋白的水平及活性會(huì)發(fā)生顯著變化。因此，監(jiān)測(cè)BAD的表達(dá)對(duì)于疾病的診斷、預(yù)后評(píng)估以及治療效果的判斷具有重要價(jià)值。
1.特異性抗體：針對(duì)人BAD的捕獲抗體和檢測(cè)抗體。
2.標(biāo)準(zhǔn)品：一系列已知濃度的人BAD蛋白，用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.底物：用于顯色反應(yīng)的物質(zhì)，如TMB（3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺）。
4.終止液：停止顯色反應(yīng)的強(qiáng)酸溶液。
5.洗滌液：清洗微孔板中未結(jié)合物質(zhì)的緩沖溶液。
6.稀釋液：用于稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的溶液。
7.封板膜：防止液體蒸發(fā)和外部污染的粘性膜片。
8.說(shuō)明書(shū)：詳細(xì)描述實(shí)驗(yàn)操作步驟和注意事項(xiàng)的文檔。
使用人Bcl2關(guān)聯(lián)死亡啟動(dòng)子elisa試劑盒進(jìn)行檢測(cè)的基本步驟如下：
1.樣本準(zhǔn)備：采集血液或組織樣本，并根據(jù)說(shuō)明進(jìn)行適當(dāng)處理以獲得血清或血漿。
2.標(biāo)準(zhǔn)品制備：按照說(shuō)明稀釋標(biāo)準(zhǔn)品至不同濃度，用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.加樣：將標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品加入預(yù)涂有抗人BAD抗體的微孔板中。
4.溫育：在特定溫度下孵育一定時(shí)間，使得樣品中的BAD與捕獲抗體充分結(jié)合。
5.洗滌：去除未結(jié)合的物質(zhì)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
6.加入檢測(cè)抗體：加入對(duì)BAD的另一個(gè)表位具有特異性的檢測(cè)抗體。
7.再次溫育和洗滌：同上，確保有效結(jié)合。
8.加入底物：加入底物啟動(dòng)顯色反應(yīng)，一般需要避光并在恒溫條件下進(jìn)行。
9.加入終止液：在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間點(diǎn)加入終止液，停止顯色反應(yīng)。
10.讀數(shù)分析：立即在酶標(biāo)儀上讀取各孔的吸光度值，并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中BAD的濃度。
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